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檢測知識
NY/T 2332-2013 紅參中總糖含量的測定 分光光度法 標(biāo)準(zhǔn)內(nèi)容
日期:2023-01-06 11:06:06作者:百檢網(wǎng) 人氣:0

NY/T2332-2013紅參中總糖含量的測定分光光度法內(nèi)容是什么?百檢網(wǎng)檢測范圍廣泛,可根據(jù)客戶需求選擇合適的檢測標(biāo)準(zhǔn)及項(xiàng)目安排檢測,全國近千家合作實(shí)驗(yàn)室,CMA/CNAS資質(zhì)齊全,可就近安排寄樣檢測。今天百檢網(wǎng)就給大家簡單介紹一下NY/T2332-2013紅參中總糖含量的測定分光光度法標(biāo)準(zhǔn)內(nèi)容。

1 范圍

本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了用分光光度法測定紅參中總糖(以葡萄糖計)的含量。

本標(biāo)準(zhǔn)適用于紅參中總糖含量的測定。

本標(biāo)準(zhǔn)方法的線性范圍為0.012mg~1.8mg。

本標(biāo)準(zhǔn)方法的定量限為1.2%。

2 規(guī)范性引用文件

下列文件對于本文件的應(yīng)用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,僅注日期的版本適用于本文件。凡是不注日期的引用文件,其*新版本(包括所有的修改單)適用于本文件。

GB/T 6682 分析實(shí)驗(yàn)室用水規(guī)格和試驗(yàn)方法

3 原理

試樣中水溶性糖和水不溶性多糖經(jīng)鹽酸水解后轉(zhuǎn)化成還原糖,與3,5-二硝基水楊酸共熱后被還原成棕紅色的氨基化合物在波長520m處測定吸光度,吸光度值與還原糖含量成正比。

4 試劑和材料

除非另有說明,均使用分析純試劑,水為GB/T 6682 規(guī)定的三級水。

4.1 10%鹽酸溶液:取27mL鹽酸加水稀釋至100mL。

4.2 10%氫氧化鈉溶液:稱取100g氫氧化鈉加水溶解并稀釋至1000mL。

4.3 30%氫氧化鈉溶液:稱取30g氫氧化鈉加水溶解并稀釋至100mL。

4.4 1%3,5-二硝基水楊酸溶液:稱取10g3,5-二硝基水楊酸,加水溶解并稀釋至1000mL。

4.5 顯色劑(DNS試劑)

a) 甲液:稱取6.9g結(jié)晶苯酚溶于15.2mL氫氧化鈉溶液(4.2)中,并稀釋至69mL,在此液中加入6.9g亞硫酸氫鈉,溶解即得。

b) 乙液:稱取255g酒石酸鉀鈉,加入300mL氫氧化鈉溶液(4.2)中,溶解后,再加入880mL3,5-二硝基水楊酸溶液(4.4)中,混勻即得。

將甲液與乙液混合搖勻,貯于棕色試劑瓶中,在室溫下放置7d后方可使用(4℃冰箱冷藏,保質(zhì)期6個月)。

4.6 葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)品(C6H12O6):含量大于99.5%。

4.7 葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液[(C6H12O6)=lmg/mL]:準(zhǔn)確稱取葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)品10mg,加少量水溶解并稀釋定容至10mL,搖勻,備用(現(xiàn)用現(xiàn)配)。

4.8 碘化鉀一碘溶液:稱取1g碘和10g碘化鉀溶于50mL水中,再加2mL冰乙酸,加水稀釋至100mL。

4.9 0.1%酚酞指示劑:稱取0.1g酚酞,加95%乙醇溶解并稀釋至100mL。

4.10 D101型大孔吸附樹脂。

5 儀器和設(shè)備

5.1分光光度計。

5.2 分析天平:感量±0.0001g。

5.3 分析天平:感量±0.01g。

5.4 恒溫水浴鍋。

5.5 渦旋振蕩器。

5.6 粉碎機(jī):配備0.25mm孔徑的金屬篩網(wǎng)。

6 分析步驟

6.1 試樣制備

取代表性樣品約100g,用粉碎機(jī)粉碎至通過0.25mm孔徑篩,裝人樣品瓶中備用。

6.2 試樣前處理

稱取1g試樣(*到0.1mg),置50ml具塞刻度試管中,用量筒加入25mL鹽酸溶液(4.1),沸水浴中加熱20min后,用碘化鉀_碘溶液(4.8)檢査水解程度(取1滴水解液于白瓷板上,加人1滴碘化鉀—碘溶液,若不顯藍(lán)色,則已水解完全;如顯藍(lán)色,則未水解完全,繼續(xù)水解,每2min檢査一次水解程度,直至不顯藍(lán)色)。水解完全冷卻后將其全部轉(zhuǎn)移至100mL錐形瓶中,加人0.5mL酚酞指示劑(4.9),用氫氧化鈉溶液(4.3)中和至溶液呈紅色,加入5gD101型大孔吸附樹脂(4.10),在渦旋振蕩器上振蕩50min后過濾,加水定容至100mL再準(zhǔn)確吸取10.0mL上述溶液置100mL容量瓶中,加水稀釋至刻度,此溶液為試樣測試液。

6.3 標(biāo)準(zhǔn)曲線的制定

分別吸取0mL、0.2mL、0.4mL、0.6mL、0.8mL、1.0mL、1.2mL和1.4mL的葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液(4.7)至25mL的具塞刻度試管中,此標(biāo)準(zhǔn)溶液葡萄糖含量相當(dāng)于0mg、0.2mg、0.4mg、0.6mg、0.8mg、1.0mg、1.2mg和1.4mg,加水至2mL,加入2 ML DNS試劑(4.5),然后將試管放入沸水浴中加熱6min,立即在冰水中冷卻后,轉(zhuǎn)移至25mL容量瓶中,定容搖勻,用分光光度計在波長520nm處測定吸光度,以葡萄糖含量為橫坐標(biāo),吸光度為縱坐標(biāo),繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。

6.4 測定

準(zhǔn)確吸取1mL待測液(6.2)于25mL的具塞刻度試管中,按6.3條“加水至2mL”以下步驟操作,以空白溶液調(diào)零,分別測定吸光度值,根據(jù)回歸方程計算相應(yīng)的糖含量。

6.5 空白試驗(yàn)

除不加試樣外,其余操作步驟同試樣溶液測定。

7 結(jié)果計算

試料中總糖(以葡萄糖計)含量ω以質(zhì)量分?jǐn)?shù)(%)表示,按式(1)計算。

ω=(m1×V×f×10-3)/(m*V1)

式中:

m1——根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計算的葡萄糖含量,單位為毫克(mg);

V——試樣的定容體積,單位為毫升(mL);

V1——比色測定時移取試樣待測液的體積,單位為毫升(mL);

f——試樣的稀釋倍數(shù);

m——試料的質(zhì)量,單位為克(g)。

…………

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